BÀI 23: THỰC HÀNH: MỘT SỐ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU VI SINH VẬT
Trang bìa
Trang bìa
Ảnh
BÀI 23: THỰC HÀNH: MỘT SỐ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU VI SINH VẬT
Mở đầu
Yêu cầu cần đạt
Hình vẽ
Thực hành được một số phương pháp nghiên cứu vi sinh vật thông dụng.
Nội dung bài thực hành
- Vật liệu và dụng cụ. - Các phương pháp phân lập và cấy vi khuẩn. - Báo cáo kết quả thực hành.
Chuẩn bị
Mẫu vật
- Một số chủng vi sinh vật: Dịch nuôi cấy hoặc môi trường lỏng chứa chủng vi sinh vật cần phân tích. - Một số dung dịch chỉ định nuôi cấy vi khuẩn đã đồng nhất
Ảnh
+ Dung dịch nuôi cấy bề mặt là môi trường rắn: dung dịch mẫu chứa thạch (từ 1,5 - 2%) trong ống thạch nghiêng hay trong đĩa petri. + Dung dịch nuôi cấy sâu trong môi trường rắn: dung dịch mẫu trong ống nghiệm thạch sâu chứa thạch mềm (0,5 - 0,7%).
Dụng cụ cấy
Ảnh
Que cấy thẳng: Que cấy kim loại có đầu nhọn, dùng để cấy vi khuẩn có tạo khuẩn ti. Que cấy móc: Que cấy có đầu vuông góc, dùng để cấy vi khuẩn có tạo khuẩn ti. Que cấy vòng: Que cấy kim loại có đầu tròn, dùng để cấy chủng từ môi trường rắn hoặc lỏng lên môi trường rắn, lỏng.
Que cấy trang: Que bằng kim loại hay thủy tinh, đầu hình tam giác dùng dể dàn trải vi khuẩn trên bề mặt thạch rắn. Ống hút thủy tinh: Dùng để chuyển một lượng vi khuẩn cần thiết lên bề mặt môi trường rắn hoặc vào môi trường lỏng. Đầu tăm bông vô trùng: Dùng để cấy giống từ môi trường lỏng lên bề mặt của môi trường rắn.
Các phương pháp phân lập, nuôi cấy vi khuẩn
1. Kĩ thuật cấy ria trên đĩa petri
Bước 1: Dùng que cấy vòng thao tác vô trùng nhúng vào dịch mẫu để có các vi khuẩn muốn phân lập (1)(2).
Ảnh
Bước 2: Ria cá đường trên đĩa petri có chứa môi trường thạch thích hợp. Sau mỗi đường ria liên tục, đốt khử trùng que cấy và làm nguội trước khi thực hiện thao tác tiếp theo (3)(4)(5)(6). Bước 3: Lật ngược đĩa và ủ ở nhiệt độ, thời gian thích hợp trong tủ ấm (7)(8).
2. Cấy giống từ môi trường lỏng sang ống nghiệm chứa môi trường lỏng
Ảnh
Bước 1: Vô trùng que cấy. Bước 2: Lấy mẫu sinh khối ra khỏi ống dịch mẫu. Bước 3: Cây giống vi khuẩn vào môi trường lỏng mới.
3. Cấy giống từ môi trường lỏng sang ống thạch nghiêng
Phương pháp tiến hành tương tự như phương pháp số 2 nhưng có khác biệt ở Bước 3: - Trên bề mặt thạch nghiêng đặt nhẹ đầu que cấy từ đáy ống nghiệm, cấy theo hình chữ chi lên đến đầu trên ống nghiệm.
Ảnh
4. Kĩ thuật cấy trang
Ảnh
Bước 1: Vô trùng thanh gạt (que cấy trang). Bước 2: Lấy vi sinh vật trong dịch mẫu bằng micropipette. Bước 3: Ủ vi sinh vật.
Ảnh
5. Cấy giống từ môi trường lỏng bằng micropipette đầu rời.
Ưu điểm: Cho phép thao tác chính xác với những dung tích nhỏ và tiện dụng khi thao tác trong môi trường trong vô trùng. Yêu cầu kĩ thuật: - Không gian vô trùng của ngọn lửa đèn cồn trong tủ cấy. - Cần chọn micropipette đầu rời thích hợp cho phạm vi thao tác. Thao tác cấy vi khuẩn: Bước 1: Chuẩn bị micropipette. Bước 2: Lấy vi khuẩn trong dịch mẫu. Bước 3: Cấy vi khuẩn vào dịch mới.
Ảnh
Ảnh
Báo cáo thực hành
Mẫu báo cáo
Ảnh